Koja je svrha korištenja ddNTP-a?
Koja je svrha korištenja ddNTP-a?

Video: Koja je svrha korištenja ddNTP-a?

Video: Koja je svrha korištenja ddNTP-a?
Video: Электрический или водяной полотенцесушитель? Что выбрать? Установка. #25 2024, Novembar
Anonim

DdNTP odnosi se na Dideoksinukleotidi trifosfati koji se koriste u Sanger dideoxy metodi za proizvodnju različitih dužina DNK lanaca za DNK sekvenciranje. Ovo rezultira prekidom procesa polimerizacije DNK (ili elongacije DNK), jer je za nastavak ovog procesa potrebna 3'-OH grupa.

Zbog toga, zašto se ddNTP koriste u sekvenciranju?

Dideoksinukleotidi su inhibitori DNK polimeraze koji produžavaju lanac, korišteno u Sanger metodi za DNK sekvenciranje . Dideoksiribonukleotidi nemaju 3' hidroksilnu grupu, stoga ne može doći do daljeg izduživanja lanca kada je ovaj dideoksinukleotid na lancu. To može dovesti do prekida DNK sekvenca.

Slično, da li se ddNTP vežu za dNTP? Jedan ili više od dNTPs su radioaktivno označeni kako bi se vizualizirali proizvodi replikacije. Konačno, svaka cijev dobija jedan od četiri posebna nukleotida koja se nazivaju dideoksinukleotidi ( ddNTPs ). Međutim, kada se jednom ugradi, DNK polimeraza ne može dalje produžiti lanac jer joj je za to potreban 3'-OH priložiti do sledećeg nukleotida.

Slično se može zapitati, kako ddNTP zaustavljaju reakciju sekvenciranja?

Kada je prisutan u malim količinama u sekvencioniranje reakcija , dideoksiribonukleozid trifosfati ( ddNTPs ) prekinuti reakcija sekvenciranja na različitim pozicijama u rastućim lancima DNK. ddNTP zaustavlja reakciju sekvenciranja jer oni: uzrokuju da DNK polimeraza otpada sa lanca šablona. c.

Koja tehnika koja uključuje dideoksinukleotide bi se mogla koristiti?

Sanger sekvenciranje je a metoda sekvenciranja DNK zasnovanog na selektivnoj inkorporaciji lanca koji završava dideoksinukleotidi pomoću DNK polimeraze tokom in vitro replikacije DNK. Razvijen od strane Frederika Sangera i njegovih kolega 1977. godine, bio je najrasprostranjeniji korišteno sekvenciranje metoda za otprilike 40 godina.

Preporučuje se: