Sadržaj:

Kako ubaciti gen u plazmid?
Kako ubaciti gen u plazmid?

Video: Kako ubaciti gen u plazmid?

Video: Kako ubaciti gen u plazmid?
Video: Свойства плазмид и их использование в генетическом клонировании. 11 класс. 2024, Novembar
Anonim

Osnovni koraci su:

  1. Otvorite plazmid i "zalijepi" u gen . Ovaj proces se oslanja na restrikcijske enzime (koji režu DNK) i DNK ligazu (koja spaja DNK).
  2. Insert the plazmid u bakterije.
  3. Odrasti puno plazmid -nose bakterije i koriste ih kao "fabrike" za proizvodnju proteina.

Takođe, kako se gen može ubaciti u plazmid GCSE?

TO JE umetnuta u plazmid pomoću enzima ligaze. the plazmid ide u bakterijska ćelija. transgena bakterija se razmnožava, što rezultira in milioni identičnih bakterija koje proizvode ljudski inzulin.

Osim toga, kako subklonirati gen? Osnovni koraci za Subkloniranje Oslobađate i pročišćavate svoj umetak iz roditeljskog vektora, ligirate ovaj umetak u pripremljeni odredišni vektor, transformišete ovu vezu ligacije u kompetentne bakterijske ćelije. Zatim pregledate transformisane ćelije za umetak.

Imajući ovo u vidu, koja su 4 koraka kloniranja gena?

U klasičnim protokolima digestije restrikcijskim enzimima i kloniranja ligacijom, kloniranje bilo kojeg fragmenta DNK u suštini uključuje četiri koraka:

  • izolacija DNK od interesa (ili ciljne DNK),
  • podvezivanje,
  • transfekcija (ili transformacija), i.
  • procedura skrininga/selekcije.

Kako pojačati plazmid?

Eksperimentalni postupak

  1. Pokrenite PCR i pročistite PCR proizvod: Pokrenite PCR da pojačate svoj umetnuti DNK.
  2. Probavite svoj DNK:
  3. Izolirajte svoj umetak i vektor prečišćavanjem gela:
  4. Povežite svoj umetak u svoj vektor:
  5. transformacija:
  6. Izolirajte gotov plazmid:
  7. Potvrdite svoj plazmid sekvenciranjem:

Preporučuje se: